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AAV 생산용 enhancer 추가 (GMP 출시)

VirusGEN® AAV Transfection Kit

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	비고
Mirus	MIR 6750	VirusGEN® AAV Transfection Kit	1 Kit (1 L cell culture)	가격문의	05.02 ~ 06.30
Mirus	MIR 6770	VirusGEN® SELECT AAV Transfection Kit	1 Kit (10 L cell culture)	가격문의
Mirus	MIR 6775	VirusGEN® SELECT AAV Transfection Kit	1 Kit (50 L cell culture)	가격문의
Mirus	MIR 6815-GMP	VirusGEN® GMP AAV Transfection Kit	1 Kit (50 L cell culture)	가격문의

Product index

Overview
다양한 세포/범용적인 도입..
효율증대를 위한 특수도입시..
세포에 따른 효율적인 유전..
Electroporation 관련
- Ingenio® solution & k..
- Ingenio® cuvette, 소..
도입물질에 따른 도입시약
in-vivo delivery 시스템
- TransIT Hydrodynamic D..
독성 제거 - Transfection ..
- MiraCLEAN® Endotoxin ..
siRNA Transfection 시약
siRNA 발현 · 분석
- pSINsi vector 시리즈
- Synthetic siRNA Quanti..
small RNA Cloning
RNAi 관련 Kit
- 14-30 ssRNA Ladder Mar..
- siRNA Ladder Marker

*VirusGEN^® SELECT 및 VirusGEN^® GMP kit의 견적 및 구매는 반드시 다카라코리아 고객지원 (T. 02-2081-2510)으로 문의 바랍니다.

높은 감염활성을 가지는 고품질의 Adeno associated virus (AAV) 생산에 최적
HEK293 세포 배양 시스템에 최적 (adherent 및 suspension 배양 모두 적용)
연구용 시약부터 전임상 단계, 임상용 GMP grade까지 라인업

제품설명

TransIT-VirusGEN^® Transfection Reagent는 expression vector와 packaging plasmid를 HEK293 타입의 패키징 세포로 효율적으로 도입하여, AAV 또는 Lentivirus의 생산율을 높여주는 transfection 시약이다.
그 중에서도 본 VirusGEN^® AAV Transfection Kit 제품은 TransIT-VirusGEN^® Transfection Reagent를 기반으로 plasmid 도입 효율을 높이기 위한 VirusGEN^® AAV Complex Formation Solution and Enhancer가 추가되어 AAV의 효율적인 생산을 위해 최적화된 제품이다.
VirusGEN^® SELECT AAV Transfection Kit는 전임상 연구 및 공정 개발에서 필요한 대규모 바이러스 생산을 위한 최적의 시약으로 간편하고 비용 효율적인 실험 프로세스를 제공한다. 또한 전임상용 바이러스 벡터 제작을 위한 transfection 시약으로 사용할 수 있도록 품질 보증 시험을 완료하였다.
([Example Certificate of Origin (PDF) | Example Certificate of Analysis (PDF) | Example BSE TSE Statement (PDF)])
따라서, 임상 시험 또는 상업적인 바이러스 생산을 위해 VirusGEN^® GMP AAV Transfection Kit를 사용할 수 있다.

그림1. 타사대비 높은 AAV functional titer
Suspension 형태로 배양한 Freestyle 293-F세포 (FreeStyle F17 Medium에서 배양)(A)와 Adherent 형태로 배양한 293T/17세포(B)에 Trans IT-VirusGEN^® Transfection Reagent (reagent : DNA (vol : wt) = 2 : 1), 타사 B4, 타사 B5, 타사 C3 (25kDa PEI)를 사용하여 pAAV-hrGFP, pAAV-RC, pAAV-Helper (1 : 1 : 1 ratio, 1.5 ㎍/㎖, Agilent Technologies)를 transfection 하여 바이러스를 생산하였다. 생산된 바이러스는 HT1080세포에 감염, 48시간 뒤 GFP발현을 유세포측정기로 측정하였다.
*Functional titer는 GFP 발현세포가 20% 미만인 virus 희석액으로부터 측정하였고, error bar는 3반복 실험군의 표준편차이다.

그림 2. TransIT-VirusGEN^® Reagent, VirusGEN^® AAV Transfection Kit - 타사 제품과의 생산효율 비교
TransIT-VirusGEN^® Reagent와 VirusGEN^® AAV Transfection Kit, 타사 A1, 타사 A3을 이용하여 AAV2의 생산효율을 비교하였다. Expi293 Expression Media (Thermo Fisher Scientific)에서 배양한 Expi293F cells (Thermo Fisher Scientific)에 pAAV-hrGFP, pAAV-RC, pAAV-Helper plasmids (1:1:1 DNA ratio, 2 ㎍/㎖ - 2 ㎎ per flask, Agilent Technologies)를 도입하고 72시간 후 lysis 시켜 AAV를 회수하였다.

A. 회수한 바이러스를 HT10180세포에 감염시키고 48시간 후에 GFP의 발현을 확인하여 역가를 측정하였다. 또 도입된 AAV의 genome copy number는 CMV promoter 영역을 ddPCR로 확인하였다.
B. 제작된 바이러스 capsid수는 AAV2 Titration ELISA Kit (Progen)을 이용하여 측정했다. 또 GC/capsid의 비율을 계산하였다
그 결과, TransIT-VirusGEN^® Reagent, VirusGEN^® AAV Transfection Kit를 이용했을 때 더 많은 역가의 AAV를 생산할 수 있었고, 특히 VirusGEN^® AAV Transfection Kit를 이용하였을 때 가장 많은 양의 AAV를 생산할 수 있었다.

보존

TransIT-VirusGEN^® Transfection Reagent: -10~-30℃ 보존
VirusGEN^® AAV Complex Formation Solution and Enhancer : 2~10℃
(SELECT, GMP 모두 동일)

VirusGEN® AAV Transfection Kit

제품설명

보존

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