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RNA의 5’ 말단을 Cap 0 → Cap 1로 변환하는 효소

mRNA Cap 2-O-Methyltransferase

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	비고	사용자매뉴얼
Takara	2470A	mRNA Cap 2-O-Methyltransferase	2,500 U	91,200원 ~~114,000원~~	02.26 ~ 04.19
Takara	2470B	mRNA Cap 2-O-Methyltransferase	10,000 U (2470A x 4)	412,000원

Product index

7-methylguanylate(m⁷G) cap 구조 (Cap 0)를 가진 RNA의 첫번째 nucleotide 2’-O 부위를 특이적으로 메틸화
mRNA의 면역원성 감소
mRNA의 translation 효율 증가

제품설명

mRNA Cap 2'-O-Methyltransferase (2’-O-MTase)는 vaccinia 바이러스 유래의 methyltransferase로 5’ 말단에 Cap 0 구조 (7-methylguanylate(m7G))를 가진 RNA에 첫번째 nucleotide의 2’-O 부위를 특이적으로 메틸화하여 Cap 1의 구조로 만든다. RNA에서 Cap 1의 구조는 체내에서 면역원성을 감소시키고 translation 효율을 증가시키는 것으로 알려져 있다.
이 제품에는 반응 buffer와 메틸기의 공여체 S-adenosylmethionine (SAM)이 포함되어 있어 고효율로 Cap 0 RNA에서 Cap 1 RNA를 제작할 수 있다.
또한 이 효소는 Vaccinia Capping Enzyme (Code 2460A)와 같이 사용하여 uncapped RNA (5’-triphosphate RNA)로부터 Cap 1의 구조를 가진 RNA를 one-step으로 제작할 수 있다 (사용자 메뉴얼 protocol-2 참고).

용도

- Vaccinia Capping Enzyme (VCE) 등으로 m⁷G cap구조 (Cap 0)가 부가된 RNA를 Cap 1 구조로 변환.
- One-step으로 uncapped RNA (5’-triphosphate RNA)에 Cap 1의 구조 부여 (※별도의 VCE 필요).
- in vitro transcription (IVT) 등으로 합성한 m⁷G cap구조 (Cap 0)를 갖는 RNA를 Cap 1 구조로 변환 (ARCA (anti reverse cap analog) 사용 시).
- mRNA의 in vivo 적용 시 translation 효율 증가 및 면역원성 감소

내용

2,500 U		mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase (50 U/㎕)
100 ㎕		10× Capping Buffer
100 ㎕		S-adenosylmethionine (SAM) (32 mM)

보존 -20℃

농도 50 U/㎕

기원

Escherichia coli carrying a plasmid containing the gene for vaccinia virus mRNA cap 2’-O-methyltransferase

일반적인 성질

- 질량: 약 40 kDa

활성의 정의

37℃에서 1시간동안 10 pmol의 Cap 0 RNA를 메틸화하는 효소 양을 1U으로 한다.

활성 측정용 반응제 조성

1×		Capping Buffer
1 mM		DTT
13.75 μCi/㎖		[3H]SAM
2 ㎍/50 ㎕		100 nt Cap 0 RNA

사용상의 주의

- 효소의 강한 교반은 삼가한다.
- Template RNA 및 실험 기구에 RNase가 오염된 경우 RNA의 yield가 낮아지거나 fragmentation 된다. 반응에 사용하는 튜브, micropipette tip 등을 RNA실험 전용으로 사용하고 일회용 장갑을 사용하여 RNase의 오염이 일어나지 않도록 주의한다.

실험 예시

- 사용자 메뉴얼 참고

관련제품

- uncapped RNA의 5’ 말단에 Cap 0 구조를 부여하는 효소 Vaccinia Capping Enzyme (Code 2460A)
- 고품질 고수율 in vitro transcription 시스템 Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System (Code 6141)
- Transfection 시약 전문 브랜드 Mirus의 mRNA 전용 Transfection 시약 TransIT-mRNA Transfection Kit (Code MIR 2250)
- 실험 기기에서 RNase 오염 제거 RNase-OFF^® (RNase Contamination 제거 용액) (Code 9037)

Keyword :

수식효소／DNA Polymerase、RNA Polymerase

Cloned

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