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Home > 전제품보기 > Epigenetics > miRNA 발현 · 정량 > MicroRNA qRT-PCR 정량
miRNA cDNA 합성과 정량

MicroRNA qRT-PCR 정량

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)		 비고 사용자매뉴얼
Clontech
 638314
 Mir-X miRNA qRT-PCR TB Green® Kit
관련학술 구매하기 라이선스  		200 회
(Package) 		725,000원  제조사 페이지로 바로가기 x102079
Clontech
 638316
 Mir-X miRNA qRT-PCR TB Green® Kit
관련학술 구매하기 라이선스  		600 회 (638314 x 3)
 1,773,000원  제조사 페이지로 바로가기
Clontech
 638313
 Mir-X miRNA First-Strand Synthesis Kit
관련학술 구매하기 		20 회
 455,000원  제조사 페이지로 바로가기 x102079
Clontech
 638315
 Mir-X miRNA First-Strand Synthesis Kit
관련학술 구매하기 		60 회 (638313 x 3)
 840,000원  제조사 페이지로 바로가기

  • 간편한 단일 반응 단계의 cDNA 합성
  • 동일한 RNA시료로 microRNA와 그 목적유전자를 정량 가능
  • 50 copies까지 적은 양의 microRNA도 검출 가능
  • 높은 특이성 High specificity
상세정보
Mir-X miRNA qRT-PCR TB Green™ Kits은 total RNA나 정제된 small RNA 시료로부터 qPCR을 통해 microRNA를 정량 할 수 있는 제품이다. 각 키트에는 First-strand cDNA synthesis제품과 Quantitative PCR (qPCR) 제품이 포함되어 있다.

(#638314 제품 내에는 miRNA의 cDNA 합성을 위한 #638313 제품과 qPCR을 위한 시약을 모두 포함하고 있습니다.
#638316 제품 내에는 miRNA의 cDNA 합성을 위한 #638315 제품과 qPCR을 위한 시약을 모두 포함하고 있습니다.)
간편한 단일 반응의 cDNA 합성
Clontech의 microRNA 정량 키트는 간편한 단일 반응으로 1st strand cDNA를 합성한다. Mir-X 제품은 RNA시료가 포함된 microRNA로부터 cDNA를 합성하도록 poly(A) polymerase와 SMART MMLV Reverse Transcriptase가 최적화된 효소를 사용한다.
MicroRNA-Specific Primers를 이용한 민감도 높은 qPCR 반응
Clontech의 TB Green™ Advantage qPCR Premix와 연구자의 microRNA-specific primer를 이용하여 qPCR로 cDNA를 증폭하고 정량한다. microRNA target 뿐만 아니라 복수의 microRNA 종들을 단일 cDNA 시료로부터 합성 가능하다. 이 제품은 최저 50 copies의 microRNA까지도 검출할 수 있다.
ROX Reference Dye LSR와 LMP의 구분
Mir-X miRNA qRT-PCR TB Green™에 포함된 ROX Reference Dye LSR과 LMP는 다음과 같이 분류하여 사용한다.
- ROX Reference Dye LSR : 488 ㎚의 Laser를 Excitation source로 사용하는 장치 또는 high ROX를 요구하는 장치
- ROX Reference Dye LMP : Lamp 또는 LED를 Excitation source로 사용하는 장치 또는 low ROX를 요구하는 장치
MicroRNA의 특이성 높은 검출
매우 유사한 Let7 miRNA 변이체 8개를 사용하여 Mir-X miRNA 정량의 특이성에 대한 실험을 실시하였다. Mir-X single-tube 반응으로 합성된 cDNA와 yeast polyA+ RNA로부터 분리된 시료 각각에 Let7 miRNAs를 첨가하였다. 그런 후 각각의 cDNA 시료를 variant-specific primers를 이용하여 Let7 subtypes의 정량 테스트를 하였다. 변종과 primer 사이에 높은 유사성에도 불구하고 Mir-X qPCR은 각각의 Let7 변종을 특이성 높게 검출하였다.

Specific quantification of Let7 miRNA variants. Using miRNA-specific primers (Panel A), Mir-X qRT-PCR was able to specifically detect and quantify each member of a series of 8 synthetic Let7 variants that had been spiked into a background of yeast poly(A) + Panel B).The primers detected each of their corresponding Let7 miRNA cognates, but did not detect the off-target variants in 63 of 64 possible combinations.

Mir-X miRNA qRT-PCR TB Green™ Kits use a single-step, single-tube reaction to produce first-strand cDNA, which is then specifically and quantitatively amplified using a miRNA-specific primer and TB Green™ Advantage qPCR chemistry. In the Mir-X cDNA synthesis reaction, RNAs are poly(A)-tailed using poly(A) polymerase, and then copied using a modified oligo(dT) primer and SMART MMLV Reverse Transcriptase.


Trichostatin A treatment alters miRNA expression in mouse ES cells. In mouse embryonic stem cells, we were able to monitor the alterations in expression for a panel of 12 miRNAs that respond to trichostatin A (TSA) treatment.

Induction and quantitation of miR-9 miRNA in mouse P19 cells. Exposing aggregated mouse P19 cell clusters to retinoic acid (RA) causes them to acquire neural cell phenotypes, which are accompanied by changes in the cellular miRNA pool. Using the Mir-X miRNA quantitation system, we tracked the abundance of one such miRNA, miR-9, which was induced by RA and continued to accumulate in these cells following a 5 day exposure to RA.

Keyword : miRNA,Mir-X,microRNA,MirX