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Cloned

DNA Polymerase I (E. coli )

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	비고	사용자매뉴얼
Takara	2130A	DNA Polymerase I（E. coli）	500 U	74,000원
Takara	2130B	DNA Polymerase I（E. coli）	2,500 U	333,000원

농도 3~6 U/㎕

형상

50 mM	Potassium Phosphate (pH6.5)
10 mM	2-Mercaptoethanol
50%	Glycerol

보존 -20℃

첨부 Buffer 조성 (10×)

500 mM	Tris-HCl (pH7.8)
100 mM	MgCl₂
1 mM	DTT
250 ㎍/ml	BSA*

*BSA가 침전될 우려가 있으므로 동결· 융해는 가능한 피한다.

기원

Escherichia coli carrying the plasmid which encodes the gene of Pol I

제품설명

본 효소는 주형, 프라이머(DNA, RNA 모두 가능) 존재하에서 dNTP를 기질로 하여, 주형에 상보적인 DNA를 5’→ 3’방향으로 합성한다. 이중가닥 특이적 5’→3’exonuclease 활성 및 단일가닥 특이적 3’→ 5’exonuclease 활성도 가진다.

활성의 정의

Poly d(A-T)합성 DNA를 주형/프라이머로 하여 37℃, pH7.4에서, 30분 동안 모든 10 nmol nucleotide를 산불용성 침전물로 바꾸는 효소 활성을 1 U으로 한다.

활성측정용 반응액조성

67 mM	Potassium phosphate (pH7.4)
6.7 mM	MgCl₂
1 mM	2-Mercaptoethanol
20 μM	기질 DNA
33 μM	dATP
33 μM	[³H]dTTP

순도

- SDS 전기영동에서 90% 이상의 순도를 나타낸다.
- 10 U의 본 효소와 1㎍의 closed circular (RF I)фX174 DNA를 37℃, 1시간 반응하여도 DNA의 전기영동 패턴에 변화가 일어나지 않는다.

사용상의 주의

- 상기 보존조건에서 6개월 이상 안정하고 희석에 의한 활성저하는 일어나지 않으나, 심하게 교반하면 실활할 수도 있다.
- Endonuclease를 포함하고 있지 않으므로 단독으로는 거의 nick translation 활성은 나타내지 않는다.
- DNA와 친화성이 강하기 때문에 과량을 사용하면 aggregation이 일어나 반응이 충분히 진행되지 않는 경우가 있다.

용도

- DNase I (TaKaRa Code 2210)과의 병용에 의한 nick translation
- Okayama-Berg법에 있어서 second strand의 합성반응 (DNA polymerase I 0.3 ㎍은 약 2.5 U에 상당한다).

Keyword :

수식효소／DNA Polymerase、RNA Polymerase

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	DNA Polymerase I (E. coli )

	Cloned
	Klenow Fragment (Large Fragment E. coli DNA Polymerase I)


	Poly(A) Polymerase

	Cloned
	SP6 RNA Polymerase

	Cloned
	T4 DNA Polymerase

	Cloned
	T7 RNA Polymerase

	Cloned
	Terminal Deoxynucleotidyl Transferase