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E. coli DNA Ligase

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Takara
2160A
E. coli DNA Ligase
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1,000 U
96,000원  2160A_DSv1901Da.pdf
Takara
2160B
E. coli DNA Ligase
관련학술 관심상품등록 구매하기
5,000 U
432,000원 

농도 50~100 U/㎕
형상
10 mM Potassium Phosphate (pH7.5)
50 mM KCl
1 mM DTT
1 mM EDTA
50% Glycerol
보존 -20℃
기원
Escherichia coli UT 481 carrying the plasmid encoding the ligase
제품설명
본 효소는 인접한 DNA 가닥의 5’-P 말단과 3’-OH 말단을 phosphodiester 결합으로 연결하는 효소이다. 보조인자로서 NAD를 요구한다. 본 효소는 돌출말단끼리의 연결반응만이 가능하나, PEG와 높은농도의 1가 양이온 존재하에서는 평활말단을 연결하는 반응도 가능하다. DNA의 5’-P 말단과 RNA의 3’-OH 말단 그리고 RNA끼리의 연결은 불가능하다.
활성의 정의
6 ㎍/20 ㎕의 λDNA-Hind III 분해물을 16℃, 30분 동안에 90% 이상 연결하는 효소 활성을 1 U으로 한다.
활성 측정용 반응액 조성
30 mM Tris-HCl (pH8.0)
4 mM MgCl2
10 mM (NH4)2SO4
1.2 mM EDTA
100 μM NAD
0.005% BSA
6 ㎍/20 ㎕ λDNA-Hind III 분해물
순도
- 360 U의 본 효소와 1 ㎍의 λDNA-Hind III 분해물을 37℃, 24시간 반응해도 DNA의 전기영동 패턴에 변화가 없다.
- 360 U의 본 효소와 1 ㎍의 supercoiled pBR322 DNA를 37℃, 24시간 반응하여도 DNA의 전기영동 패턴에 변화가 없다.
- 360 U의 본 효소와 2 ㎍의 5S rRNA를 37℃, 24시간 반응하여도 RNA의 전기영동 패턴에 변화가 없다.
사용상의 주의
본 효소는 대장균의 과잉생산 재조합주로부터 정제하여 불순물을 거의 포함하지 않는 아주 높은 순도의 제품이다. 따라서 고농도이지만 대량으로 사용하여도 전혀 문제가 없다.
용도
Okayama-Berg법과 Gubler-Hoffman법에 의한 cDNA 합성시의 second strand의 합성(Okayama-Berg법에서의 사용량은 약 50 U, Gubler-Hoffman법에서의 사용량은 약 1.5 U 이다.)

Keyword :
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수식효소/Ligase
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