| 제조사 |
제품코드 |
제품명 |
용량 |
가격
(부가세별도) |
비고 |
사용자매뉴얼 |
Takara
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2420A
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Mung Bean Nuclease
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2,000 U
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96,000원
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Takara
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2420B
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Mung Bean Nuclease
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10,000 U
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432,000원
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농도 10~50 U/㎕
형상
| 10 mM |
Tris-HCl (pH7.5) |
| 0.1 mM |
(CH3COO)2 Zn |
| 50% |
Glycerol |
보존 -20℃
첨부 버퍼 조성(10×)
| 300 mM |
CH3COONa (pH5.0) |
| 1,000 mM |
NaCl |
| 10 mM |
(CH3COO)2Zn |
| 50% |
Glycerol |
기원
Mung bean sprouts
제품설명
본 효소는 단일가닥 특이적인 endonuclease로써 5’-P 말단을 갖는 mono 또는 oligonucleotide를 생성한다. 과량(1,000배)의 효소를 사용하면, oligomer도 전부 mononucleotide가 된다. 이중가닥 DNA와 RNA, 또는 DNA-RNA의 hybrid에 대해서는 다량의 효소를 사용하지 않으면 분해되지 않는다. 이 경우는 AT-rich 영역을 선택적으로 분해한다. A↓ pN, T↓ pN site를 선호해, 특히 A↓ pN site는 100% 분해하지만 C↓ pC, C↓ pG site는 분해하기 어렵다.
활성의 정의
열변성 송아지 흉선 DNA를 기질로 하여 37℃, pH5.0에서 1분 동안 1 ㎍의 산가용성 분해물을 생성하는 효소활성을 1 U으로 한다.
활성 측정용 반응액 조성
| 30 mM |
CH3COONa (pH5.0) |
| 100 mM |
NaCl |
| 1 mM |
(CH3COO)2Zn |
| 10% |
Glycerol |
| 0.5 mg/ml |
기질 DNA |
순도
30 U의 본 효소와 1 ㎍의 λDNA-Hind III 분해물을 37℃, 10분간 반응하여도 DNA의 전기영동 패턴에 변화가 없다.
사용상의 주의
- 이중가닥 식별능력은 염기서열에 의존하고 있어, 절단점으로 A↓ pN과 T(U)↓ pN 을 선호한다. 특히 A↓ pA를 완전히 분해하지만 G와 C의 서열을 거의 분해하지 않는다.
- S1 Nuclease와 달리, nick의 반대쪽 가닥은 절단하지 않는다.
용도
- Hybridization의 mapping (S1 mapping) 특히 본 효소는 S1 nuclease와 비교하여 과소화 (nibbling)하지 않아 정확한 밴드를 형성한다.
- 이중가닥 DNA말단의 평활 말단화(단, 평활화의 효율은 염기서열에 의존하므로 주의할 것)
Keyword :
수식효소／Nuclease、Topoisomerase
