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Home > 전제품보기 > Cloning 관련 > TA-Cloning, 평활말단 Cloning > Kilo-Sequence 용 Deletion Kit
Deletion Mutant 제작에

Kilo-Sequence 용 Deletion Kit

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Takara
6030
Kilo-Sequence 용 Deletion Kit
관련학술 구매하기
5 회
219,000원  6030_e.v1003_1804.pdf

제품설명
본 제품은 M13 Phage vector (mp18/19), pUC 계열 plasmid 또는 phagemid vector (pUC18/19)의 MCS (Multiple Cloning Site)에 cloning되어 있는 긴 DNA 단편의 sequencing을 위해 개발되었다. 타겟 DNA를 말단에서 한 방향으로 분해해서 각각 길이가 다른 clone을 효과적으로 제작할 수 있다. 이를 통해 vector에 있는 primer binding site와 insert 사이에 DNA를 제거하거나, 이렇게 deletion된 subclone들을 효과적으로 self-circularization할 수 있다. 이 kit는 Henikoff의 방법과 Yanisch-Perron의 방법을 개량한 방법이다.
내용 (5 회)

Exonuclease III (180 U/㎕)

10 ㎕

Exo III Buffer

500 ㎕

Mung Bean Nuclease (25 U/㎕)

20 ㎕

B solution

500 ㎕

Klenow Fragment (2 U/㎕)

10 ㎕

Klenow Buffer

250 ㎕

Ligation Solution A *

500 ㎕

Ligation Solution B *

60 ㎕

* DNA Ligation Kit Ver.1 (Code 6021)에 포함된 시약과 동일

보존 -20℃
용도
- DNA sequencing
- 길이가 긴 DNA 단편의 sequencing
Long DNA fragment의 sequencing 원리
이 제품은 M13계 또는 pUC계 vector 등에 삽입된 DNA 단편의 3’-recessed end 또는 평활말단 (blunt end)을 Exonuclease III의 이중 가닥 특이적 3’→5’ exonuclease 활성을 이용해 단일 가닥 DNA로 만든다. 이 단일 가닥 DNA 부분을 Mung Bean Nuclease와 Klenow fragment의 활성으로 평활말단 (blunt end)으로 만들 수 있다. 본 kit를 사용해서 긴 DNA 단편을 sequencing에 적당한 크기의 deletion mutant로 제작할 수 있다. 또한, 목적 region만을 포함한 clone을 제작할 수 있다.

* M13mp18 BamH I site에 cloning된 DNA 단편을 deletion 시키는 경우

Keyword :

TA-Cloning, 평활말단 Cloning
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