제품설명
DNA Ligation Kit <Mighty Mix>는 T4 DNA Ligase에 의한 ligation 반응에 필요한 시약을 모두 포함하는 1 solution type의 premix 시약이다.
Ligation 효율을 최적화한 반응액 조성으로 간편하게 다양한 ligation 반응에 적용할 수 있다.
- 편리한 1 solution premix 타입
: Ligation Mix와 DNA 용액과 혼합하는 것으로 다양한 유형의 ligation 반응 가능
- Sticky end는 뿐만 아니라, Blunt end ligation, TA cloing에도 최적
- 16℃, 30분의 표준 프로토콜 뿐만 아니라, 간단한 plasmid vector ligation시 25℃, 5분의 고속 프로토콜 가능
- 50회의 동결융해에도 성능 저하가 없음을 확인
내용 (100회, 1반응 당 7.5 ㎕ 사용시)
보존 -20℃
반응량 및 반응조건
|
DNA용액：Ligation Mix의 용량비 |
반응 조건 |
(1) Plasmid vector에 외래 DNA 삽입
【표준 프로토콜】
【고속 프로토콜】 |
1：1 |
16℃, 30분
25℃, 5분 |
(2) T vector에 PCR산물 cloning |
1：1 |
16℃, 30분 |
(3) Linker Ligation, Adaptor Ligation
Plasmid vector에 Linker DNA 삽입
cDNA에 Adaptor, Linker Ligation |
1：1
1：2 |
16℃, 30분 |
(4) λ phage vector에 외래 DNA 삽입*
(in vitro packing) |
1：2 |
26℃, 10분 |
*DNA Ligation Kit Ver.1 (Code 6021)와 동일한 효율을 얻을 수 있지만, 사용양에서는 Ver.1 사용이 더 유리하다
안정성
본 제품의 동결 융해에 의한 효율 변화를 확인하기 위해 pUC118- Hind III/BAP vector와 564 bp Hind III 단편의 ligation 실험을 진행한 결과, 50 회의 동결융해 반복에도 효율의 저하는 나타나지 않았다.
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