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PrimeSTAR 등 High fidelity 효소를 이용한 PCR 산물의 TA-cloning

Mighty TA-cloning Reagent Set for PrimeSTAR®

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	비고	사용자매뉴얼
Takara	6019	Mighty TA-cloning Reagent Set for PrimeSTAR®	20 회	257,000원

Product index

제품설명

PrimeSTAR HS DNA Polymserase (Code R010A) 등의 α형 DNA polymerase (Pyrobest, Pfu, Vent등 포함)에 의해 증폭된 PCR산물의 대부분은 효소가 가지는 강력한 3'→5' exonuclease활성에 의해 PCR 산물 양 말단이 평활화되어 그대로 TA-cloning에 사용할 수 없다. 따라서 PrimeSTAR 시리즈에 의해 증폭된 PCR 산물을 TA-cloning에 이용하는 경우, 3'말단에 dA를 부가할 필요가 있다.
본 제품에는 PrimeSTAR시리즈에 의해 증폭된 산물의 3'말단에 간편하게 dA를 부가하기 위한 A-overhang mixture 및 Mighty TA-cloning Kit가 포함되어 있어 PrimeSTAR 시리즈 (Pfu 계열의 PCR효소 포함)에 의한 증폭 산물 전용의TA-cloning 시약으로 사용할 수 있다.

내용 (20 회)

A. Mighty TA-cloning Kit
pMD20-T vector (50 ng/μl)	20 μl
Ligation Mighty Mix^*1	50 μl×2
Positive Control Insert^*2	10 μl

B. A-overhang mixture
A-overhang enzyme	10 μl
10×Buffer	20 μl
dATP	10 μl

^*1 Ligation Mighty Mix는 DNA Ligation Kit <Mighty Mix> (TaKaRa Code 6023)과 같은 것임.
^*2 3’ 말단에 dA overhang을 가지는 약 200 bp의 DNA fragment (E. coli genome을 주형으로 TaKaRa Ex Taq으로 증폭함)(10 ng/μl)

pMD20-T vector의 구조

그림 1. pMD20-T vector의 구조

그림 2. pMD20-T vector의 MCS site

보존 -20℃

Keyword :

TA-Cloning, 평활말단 Cloning

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