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2× Premix PCR Solution

PCR 용 Premix 시약 시리즈(Hot Start Version)

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Takara
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100 회
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Premix Taq Hot Start Version
제품설명
본 제품은 Hot Start PCR용의 DNA polymerase, 반응 buffer, dNTP mixture를 2배의 농도로 혼합한 것이다. TaKaRa Ex Taq HS, TaKaRa Taq HS는 anti-Taq antibody와 TaKaRa Ex Taq 또는 TaKaRa Taq을 혼합한 Hot Start PCR 용 효소로 고온으로 가열할 때까지는 anti-Taq antibody가 효소에 결합해 polymerase 활성을 억제하므로 cycle 전의 mis-priming과 primer dimer에서 유래한 비특이적 증폭을 막을 수 있다. Anti-Taq antibody는 PCR 최초의 DNA 변성 단계에서 변성하기 때문에 종전의 PCR 조건으로 반응할 수 있다. Anti-Taq antibody 항체를 실활시키기 위한 특별한 단계는 필요 없다.
조성
TaKaRa Taq HS 1.25 units/25 μl
dNTP Mixture 2×conc:각 0.4 mM
PCR buffer 2×conc:
- 20 mM Tris-HC(l pH8.9)
- 100 mM KCl
- 3 mM MgCl2
PCR 산물에 대해
Premix Ex Taq Hot Start Version, Premix Taq Hot Start Version을 이용해서 증폭한 PCR 산물의 대부분은 3' 말단에 A가 1염기 부가되어 있다. 따라서 이 PCR 산물을 그대로 T-vector에 클로닝할 수 있다. 또한, 말단 평활화 및 인산화를 실시해 blunt end의 vector로 cloning 할 수 있다.
PCR 검정
1. λDNA을 주형으로 한 PCR 반응에 있어서 양호한 증폭이 확인되었다.
2. Human genomic DNA를 주형으로 한 single copy gene의 PCR 반응(증폭산물 2.9 kb)에 대해 양호한 증폭을 확인했다.
PCR 반응예 (total 50ul PCR)
Premix Ex Taq Hot Start Version or PremixTaq Hot Start Version* 25 μl
Template <1 μg
Primer 1 0.2~1.0 μM(final conc.)
Primer 2 0.2~1.0 μM(final conc.)
멸균 증류수 up to 50 μl
* 천천히 섞어서 균일하게 혼합해서 사용한다.
PCR 조건
PCR 최초의 DNA 변성 단계에서 Anti-Taq antibody 실활(失活) 되므로 종전의 PCR 조건을 사용할 수 있다. Anti-Taq antibody를 실활 시키기 위한 특별한 단계는 필요 없다.
예) 1 kb DNA 증폭시
98℃ 10 sec, 55℃ 30 sec, 72℃ 1 min&nbs

Keyword :
-
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