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Home > 전제품보기 > PCR > PCR Enzyme (TaKaRa) > SpeedSTAR™ HS DNA Polymerase
다용도 고속 PCR 용 효소

SpeedSTAR™ HS DNA Polymerase

-

제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Takara
RR070A
SpeedSTAR™ HS DNA Polymerase
관련학술 관심상품등록 구매하기 라이선스 
250 U
250,000원  RR070A_e.v1704Da.pdf, RR070_e.v1106Da_b.pdf
Takara
RR070B
SpeedSTAR™ HS DNA Polymerase
관련학술 관심상품등록 구매하기 라이선스 
1,000 U
(250 U x 4)
900,000원 

제품설명
SpeedSTAR™ HS DNA Polymerase는 고속 PCR용으로 개발된 Hot Start DNA polymerase로, 최적화된 Fast Buffer I 또는 II을 사용하여 고속 PCR을 진행할 수 있다.
일반적인 PCR용 DNA polymerase는 1분/kb를 기준으로 extension 시간을 설정하지만, 본 제품은 10초/kb의 설정이 가능하다. 양호한 반응성을 유지하면서 PCR의 각 step, 특히 extension 시간을 단축할 수 있기 때문에 단시간에 PCR 결과를 얻을 수 있다. 또, anti-Taq antibody를 이용한 Hot Start 효소로, cycling 전의 mis-annealing이나 primer dimer에 의한 비특이적 증폭을 억제하여 특이성이 높은 증폭 결과를 얻을 수 있다.
내용

1.

SpeedSTAR HS DNA Polymerase (5 U/㎕)

50 ㎕

2.

10× Fast Buffer I (30 mM Mg2+ plus) *1

1 ㎖

3.

10× Fast Buffer II (20 mM Mg2+ plus)*1

1 ㎖

4.

dNTP Mixture (각 2.5 mM)

800 ㎕

*1 Mg2+ 농도는 Fast Buffer I 가 30 mM (10 ×), Fast Buffer II 가 20 mM (10 ×)입니다
보존 -20℃
첨부 버퍼에 대해
본 제품에는 2 종류의 buffer (10× Fast Buffer I, 10× Fast Buffer II)가 첨부되어 있다. 증폭 산물의 길이에 따라 구분하여 사용하는 것을 권장한다.
증폭산물의 길이에 따라 2 kb 이하는 Fast Buffer I, 2 ~ 4 kb는 I 또는 II, 4 kb 이상에는 Fast Buffer II를 사용하여 최적의 효율을 얻을 수 있다.
실험 예 - Fast PCR 성능 확인
SpeedSTAR HS 및 TaKaRa Ex Taq HS를 이용하여 E. coli genomic DNA를 주형으로 다양한 크기의 유전자를 2 step PCR로 증폭한 결과, SpeedSTAR HS를 이용하였을 때 적은 소요시간으로 양호한 증폭을 확인할 수 있었다.

증폭길이

SpeedSTAR HS

TaKaRa Ex Taq HS

1, 2 kb

 

 

 

94 ℃

1 min

 

94 ℃

1 min

 

95 ℃

5 sec

30 cycles

98 ℃

10 sec

30 cycles

65 ℃

20 sec

68 ℃

2 min

Fast Buffer I 사용

 

소요시간 33분

소요시간 96분

4, 6 kb

 

 

 

 

94 ℃

1 min

 

94 ℃

1 min

 

95 ℃

5 sec

30 cycles

98 ℃

10 sec

30 cycles

65 ℃

60 sec

68 ℃

6 min

Fast Buffer II 사용

72 ℃

10 min

 

소요시간 53분

소요시간 3시간 46분

8, 10 kb

 

 

 

 

94 ℃

1 min

 

94 ℃

1 min

 

98 ℃

5 sec

30 cycles

98 ℃

10 sec

30 cycles

68 ℃

2 min

68 ℃

10 min

Fast Buffer II 사용

72 ℃

10 min

 

소요시간 83분

소요시간 5시간 46분

18, 20 kb

 

 

 

 

 

94 ℃

1 min

 

94 ℃

1 min

 

98 ℃

5 sec

30 cycles

98 ℃

10 sec

30 cycles

68 ℃

5 min

68 ℃

15 min

72 ℃

5 min

 

72 ℃

10 min

 

Fast Buffer II 사용

 

 

 

소요시간 3시간 29분

소요시간 8시간 16분

증폭 산물의 말단
SpeedSTAR™ HS DNA Polymerase를 이용해 증폭한 PCR 산물의 대부분은 3'말단에 A가 1 염기 부가되어 있다. 따라서 PCR 산물을 직접 T-Vector (pMD20 (Code 3270), pMD19 (Simple) (Code 3271) 등) 또는 Mighty TA-cloning Kit (Code 6028)을 이용하여 cloning할 수 있다.
또, Mighty Cloning Reagent Set (Blunt End) (Code 6027)로 평활 말단화 및 인산화를 처리를 하여, 평활 말단 vector에도 cloning할 수 있다.

Keyword :
-
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