´Ý±â
TaKaRa
Á¦Ç°¸í/Á¦Ç°ÄÚµå
Å°¿öµå°Ë»ö
°Ë»ö
´Ý±â
  • °í°´Áö¿ø 
  • ¾÷¹«¾È³»¦¢Á¦Ç°¹®ÀÇ
  • ÀüÈ­¹øÈ£¦¢02-2081-2510
  • Email     ¦¢support@takara.co.kr
  • ´ëÀüÁö»ç 
  • ¾÷¹«¾È³»¦¢´ëÀü/ÃæûÁö¿ª ÁÖ¹®, Á¦Ç°¹®ÀÇ
  • ÀüÈ­¹øÈ£¦¢042-828-6525
  • Email     ¦¢tkbd@takara.co.kr
  • ¾÷¹«½Ã°£¾È³»
  • [ Æò¡¡¡¡ÀÏ ] 09 : 00 ~ 18 : 00 ¦¢ [ Á¡½É½Ã°£ ] 12 : 00 ~ 13 : 00
  • Å䡤ÀÏ¿äÀÏ, °øÈÞÀÏÀº ÈÞ¹«ÀÔ´Ï´Ù.
Home > ÀüÁ¦Ç°º¸±â > PCR > Direct PCR: MightyAmp > Genotyping¿ë ÃßÃâ½Ã¾àÆ÷ÇÔ
DNA °£ÀÌÃßÃâºÎÅÍ genotyping±îÁö ÇϳªÀÇ kit·Î

Genotyping¿ë ÃßÃâ½Ã¾àÆ÷ÇÔ

-

Á¦Á¶»ç Á¦Ç°ÄÚµå Á¦Ç°¸í ¿ë·® °¡°Ý
(ºÎ°¡¼¼º°µµ)
ºñ°í »ç¿ëÀڸŴº¾ó
Takara
R074A
MightyAmp¢â Genotyping Kit
°ü·ÃÇмú ±¸¸ÅÇϱâ
200 ȸ
412,800¿ø 
516,000¿ø
°¡°ÝÇÒÀÎ
09.02 ~ 10.31
R074A_e.v1807Da.pdf

  • PCR ÁõÆøÀ» ÀÌ¿ëÇÑ genotyping¿¡ ÃÖÀû
  • ¸¶¿ì½º²¿¸®, ½Ä¹°ÀÙ, ½Ò µî¿¡¼­ °£´ÜÇÏ°Ô DNA ÃßÃâ ÈÄ PCR ÁõÆø
  • °£ÀÌ ÃßÃâ½Ã¾à ¹× crude »ùÇÃÀü¿ë MightyAmp DNA Polymerase, Àü¿ë loading dye±îÁö ¸ðµÎ Æ÷ÇÔ
Á¦Ç°¼³¸í
MightyAmp Genotyping Kit´Â ¸¶¿ì½º²¿¸® µîÀÇ µ¿¹° Á¶Á÷À̳ª ½Ä¹° Á¶Á÷ µîÀ¸·ÎºÎÅÍ °£ÆíÇÏ°Ô DNA¸¦ ÃßÃâÇØ PCR ÁõÆøÀ» Çϱâ À§ÇÑ Á¦Ç°ÀÌ´Ù.
º» Á¦Ç°¿¡ Æ÷ÇԵǾî ÀÖ´Â Àü¿ë ÃßÃâ buffer¿Í Proteinase K¸¦ ÀÌ¿ëÇÏ¿© µ¿½Ä¹° Á¶Á÷ µîÀ¸·ÎºÎÅÍ Á÷Á¢ DNA ÃßÃâÀÌ °¡´ÉÇÏ´Ù.
PCR¿¡´Â crude sample¿¡¼­µµ °­·ÂÇÑ ÁõÆø´É·ÂÀ» °¡Áö´Â MightyAmp DNA Polymerase¸¦ »ç¿ëÇÏ¿©, ÀϹÝÀûÀÎ PCR È¿¼Ò·Î´Â ÁõÆøÀÌ ¾î·Á¿î PCR ÀúÇØ ¹°ÁúÀ» ¸¹ÀÌ Æ÷ÇÔÇÑ crude ÃßÃâ¾×¿¡¼­ GC-, AT- rich¸¦ ºÒ¹®ÇÏ°í, ±¤¹üÀ§ÇÑ Å¸°ÙÀÇ ÁõÆøÀÌ °¡´ÉÇÏ´Ù.
ƯÈ÷ 2 kbÁ¤µµ±îÁöÀÇ ÂªÀº ´ÜÆí¿¡¼­ ÃÖ°íÀÇ ÁõÆøÈ¿À²À» ³ªÅ¸³»¸ç, ÀûÀº ¾çÀÇ template¸¦ »ç¿ëÇصµ ¾çÈ£ÇÑ ¹ÝÀÀ¼ºÀ» ³ªÅ¸³½´Ù.
¶ÇÇÑ È¥ÀçÇÏ´Â ÇùÀâ¹°ÀÇ ¿µÇâÀ» ÁÙ¿©ÁÖ´Â Àü¿ë loading dye¸¦ ÀÌ¿ëÇØ PCR ÁõÆø»ê¹°À» Àü±â¿µµ¿ÇÔÀ¸·Î¼­, ´Ü½Ã°£¿¡ ¾çÈ£ÇÑ °ËÃâÀÌ °¡´ÉÇÏ¿© À¯ÀüÀÚÇü ÆÇÁ¤¿¡ ÃÖÀûÀÌ´Ù.
º» È¿¼Ò´Â 98¡É±îÁö polymerase È°¼ºÀ» ¾ïÁ¦ÇÏ´Â °­·ÂÇÑ ´ÜÀÏ Å¬·Ð Ç×ü¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ hot stare PCRÈ¿¼ÒÀ̹ǷΠºñƯÀÌÀû ÁõÆøÀ» È¿À²ÀûÀ¸·Î ¸·À» ¼ö ÀÖ´Ù.
³»¿ë
MightyAmp Genotyping Kit (Code R074A, 50 §¡ ¹ÝÀÀ½Ã 200ȸ)
1. MightyAmp DNA Polymerase(1.25 U/¥ìl)

200§¡

2. 2¡¿MightyAmp Buffer(Mg2+, dNTP plus)*1

1.25§¢¡¿4

3. 5¡¿Loading Dye

1 §¢¡¿3

4. Extraction Buffer

20 §¢

5. Proteinase K

200 §¡

*1 Mg2+ ³óµµ´Â 4 mM(2¡¿), dNTP ³óµµ´Â °¢ 800uM (2x).
º¸Á¸
-20¡É
Extraction Buffer´Â °³ºÀ ÈÄ ½Ç¿Âº¸°ü
Primer ¼³°è½Ã ÁÖÀÇÁ¡
Primer ¼³°è ¼ÒÇÁÆ®¸¦ ÀÌ¿ëÇÏ¿© ÃÖÀûÀÇ primer ¼­¿­À» ¼±ÅÃÇÏ´Â °ÍÀÌ Áß¿äÇÏ´Ù.
- Tm°ª(¾Æ·¡½Ä*¿¡¼­ °è»ê)ÀÌ 60 ¡É ÀÌ»óÀÌ µÇµµ·Ï ¼³°èÇÏ´Â °ÍÀ» ÃßõÇÑ´Ù.
   * Tm°ª(¡É)= [(nA£«nT)¡¿2]£«[(nC£«nG)¡¿4]-5

¡Ø MightyAmp DNA PolymeraseÀÇ °æ¿ì, À̳ë½ÅÀ» Æ÷ÇÔÇÑ primerÀÇ »ç¿ëÀº ÇÇÇÑ´Ù.
ÁõÆø »ê¹°ÀÇ ¸»´Ü
MightyAmp DNA Polymerase¸¦ ÀÌ¿ëÇØ ÁõÆøÇÑ PCR »ê¹° ´ëºÎºÐÀº 3£§¸»´Ü¿¡ A°¡ 1 ¿°±â ºÎ°¡µÇ¾î ÀÖ´Ù. µû¶ó¼­ PCR »ê¹°À» Á÷Á¢ T-Vector (pMD20 (Code 3270), pMD19 (Simple) (Code 3271) µî) ¶Ç´Â Mighty TA-cloning Kit (Code 6028)À» ÀÌ¿ëÇÏ¿©cloningÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù.
¶Ç, Mighty Cloning Reagent Set (Blunt End) (Code 6027)·Î ÆòÈ° ¸»´ÜÈ­ ¹× ÀλêÈ­¸¦ 󸮸¦ ÇÏ¿©, ÆòÈ° ¸»´Ü vector¿¡µµ cloningÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù.
Troubleshooting

Çö»ó

¹®Á¦Á¡

°³¼±¹æÇâ

ÁõÆøµÇÁö ¾Ê´Â´Ù
ÁõÆøÈ¿À²ÀÌ ³ª»Ú´Ù

PrimerÀÇ Tm°ª

À§ÀÇ °è»ê½ÄÀ» Âü°íÇÏ¿© Primer¸¦ ¼³°èÇÑ´Ù.

2 step PCR

3 step PCR·Î ¹ÝÀÀ Á¶°ÇÀ» º¯°æÇÑ´Ù.

3 step PCR

2 step PCR·Î ¹ÝÀÀ Á¶°ÇÀ» º¯°æÇÑ´Ù.
(3 step PCR·Î ÁõÆøµÇÁö ¾Ê´Â °ÍÀÌ 2 step·Î ÁõÆøµÇ´Â °æ¿ì°¡ ÀÖ´Ù)

Annealing ¿Âµµ

2 ¡É ³·°Ô º¯°æÇÑ´Ù.

Cycle ¼ö

Cycle ¼ö¸¦ ÃÖ´ë 40 cycles±îÁö ´Ã¸°´Ù.

»ùÇà ¾ç

* PCR ¹ÝÀÀ¾×¿¡ ³Ö´Â ÃßÃâ¾×À» ÁÙÀ̰ųª ȤÀº ´Ã¸°´Ù.
* ÃßÃâ¾×¿¡ ³Ö´Â ½Ã·áÀÇ ¾çÀ» ÁÙÀ̰ųª ȤÀº ´Ã¸°´Ù.

ºñƯÀÌÀûÀÎ ÁõÆø

PrimerÀÇ Tm°ª

À§ÀÇ °è»ê½ÄÀ» Âü°íÇÏ¿© Primer¸¦ ¼³°èÇÑ´Ù.

3 step PCR

2 step PCR·Î ¹ÝÀÀ Á¶°ÇÀ» º¯°æÇÑ´Ù.

Cycle ¼ö

Cycle ¼ö¸¦ 25~30 cycles·Î ¼³Á¤ÇÑ´Ù.

°ü·ÃÁ¦Ç°
- ¹ü¿ëÀûÀÎ ¿Ã¶ó¿î´õ agarose: SeaKem LE Agarose
- 5ºÐ¸¸¿¡ Àü±â¿µµ¿ ¿Ï·á! Precast gel system: FlashGel¢â System
- ÄÄÆÑÆ®ÇÑ 96 well gradient PCR ±â±â: Clontech PCR Thermal Cycler GP

Keyword :

Direct PCR: MightyAmp
>
°­·ÂÇÏ°Ô ÁøÈ­ÇÑ direct PCR¿ë È¿¼Ò
°­ÇÑ ÁõÆø´É·Â- Ver.3
>
DNA °£ÀÌÃßÃâºÎÅÍ genotyping±îÁö ÇϳªÀÇ kit·Î
Genotyping¿ë ÃßÃâ½Ã¾àÆ÷ÇÔ
>
ÃßÃâ Á¶ÀÛÀÌ ÇÊ¿ä¾ø´Â direct PCRÀÌ °¡´É!!
񃧯-Ver.2