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열감수성이 높고, 안정된 PCR 결과를 위해

Uracil DNA Glycosylase (UNG), heat-labile

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Takara
2820
Uracil DNA Glycosylase (UNG), heat-labile
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200 U(200 회)
236,000원  118831
Takara
4035
dU plus dNTP Mixture(12.5×)
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800 μl
130,000원  4035_DS.v1701Da.pdf

제품 설명
Uracil DNA Glycosylase (UNG)는 우라실을 포함한 DNA의 deoxyribose sugar와 우라실 염기 사이의 N-glycosylic bond를 가수분해하여 탈필리미딘 부위를 만드는 역할을 한다. 본 효소는 우라실을 포함한 single strand DNA와 double strand DNA는 가수분해하지만, RNA에는 작용하지 않는다.
형상
20 mM Tris-HCl, pH 7.5 (at 25℃)
50 mM NaCl
1 mM DTT
0.1% (v/v) Triton X-100
50% (v/v) Glycerol
기원
Produced in an E. coli ung- strain expressing a recombinant clone of Gadus morhua (cod) liver UNG
Specific activity
> 500,000 U/mg
활성의 정의
우라실을 포함한 DNA를 기질로 70 mM Tris-HCl, pH7.5 (at 25℃), 10 mM NaCl, 1 mM EDTA, 100 μg/ml BSA를 포함한 반응액 중 37℃에서 1시간 동안 1 nmol의 우라실을 유리시키는 효소 활성을 1 U로 한다.
순도
1. Endonuclease activity : 50 U의 본 효소와 1 μg의 pGEM DNA를 37℃ 2시간 반응시켜도, DNA의 전기 영동 패턴에 변화는 일어나지 않는다.
2. Exonuclease activity : 50 U의 본 효소와 3H-labelled DNA를 37℃으로 2시간 반응시켜도, 유리의 방사 활성에 의한 exonuclease 활성은 검출되지 않는다.
열실활 (Inactivation by heat)
본 효소는 50℃, 10 분간 열처리를 하면, 완전히 비가역적으로 실활된다.
사용 예

[PCR carryover prevention 사용방법]

1. 아래와 같은 PCR 반응액을 조제한다.
TaKaRa Taq Hot Start Version (5 units/μl) 0.25 μl
10×PCR Buffer (Mg2+ plus) 5 μl
dU plus dNTP Mixture (Code 4035) 4 μl
25 mM MgCl2 1.5 μl
UNG (2 U/μl) 0.5 μl
Primer 1 10~50 pmol
Primer 2 10~50 pmol
멸균 증류수 up to 50 μl

2. 25℃로 10분 반응한다.
3. 95℃로 2분 열실활 한다.
4. 계속해서 PCR 반응을 실시한다.

사용 예의 상세한 내용에 대해서는 TaKaRa PCR Carryover Prevention Kit(Code 6088)의 매뉴얼에서 확인할 수 있습니다.
    - 본 효소의 최적 사용량은 목적에 따라서 다르지만, 50 μl 반응시 통상 0.1~1 U를 사용한다.
    - 본 효소는 일반적인 PCR 및 RT-PCR의 반응액 중에서 작용한다.
보존
- 20℃

Keyword :
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