제품설명
TaKaRa Taq™은 Thermus aquaticus DNA polymerase 유전자를 cloning 후 형질전환한 대장균으로부터 정제된 94 kDa의 recombinant Taq polymerase로 천연의 Taq DNA polymerase와 동등한 기능을 갖고 있다.
본 제품은 TaKaRa Taq™에 Anti-Taq antibody를 이용한 Hot Start PCR용 효소이며, 고온에 도달할 때까지는 antibody가 결합하고 있어 polymerase 활성을 억제한다. 따라서 PCR cycle을 시작하기 전에 발생할 수 있는 mispriming이나 primer dimer에 의한 비특이적 증폭을 방지할 수 있다.
Anti-Taq antibody는 PCR cycle의 최초 DNA denaturation 단계에서 변성되므로 Anti-Taq antibody제거를 위한 추가 과정은 필요하지 않고, 기존에 사용하던 PCR 조건을 그대로 사용한다.
내용 (250 U)
| 1. TaKaRa Taq HS (5 U/㎕) |
50 ㎕ |
| 2. 10× PCR Buffer (Mg2+ plus) |
1 ㎖ |
| 3. dNTP Mixture (각 2.5 mM) |
800 ㎕ |
보존 -20℃
형상
20 mM |
Tris-HCl (pH8.0) |
100 mM |
KCl |
0.1 mM |
EDTA |
1 mM |
DTT |
0.5% |
Tween 20 |
0.5% |
NP-40 |
50% |
Glycerol |
첨부 10× PCR Buffer 조성
100 mM |
Tris-HCl (pH8.9) |
500 mM |
KCl |
15 mM |
MgCl2 |
첨부 dNTP Mixture 조성*
농도 |
각 2.5 mM |
형상 |
수용액 (나트륨염), pH7~9 |
순도 |
각 98% 이상 |
*dATP, dCTP, dGTP, dTTP등 몰 혼합물로 희석하지 않고 그대로 PCR반응에 이용할 수 있다.
PCR 산물에 대하여
TaKaRa Taq™을 이용하여 증폭한 PCR 산물의 대부분은 3’ 말단에 A가 1염기 부가되어 있다. 따라서 이 PCR 산물을 그대로 T-vector pMD20 (Code 3270) 또는 T-vector pMD19 (Simple) (Code 3271)에 cloning할 수 있다. 또한 말단 평활화 및 인산화 후, 평활 말단 vector에 cloning할 수도 있다.
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