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Hot spot 없이 Random하게 돌연변이를 도입할 수 있는

Diversify PCR Random Mutagenesis Kit

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)		 비고 사용자매뉴얼
Clontech
 630703
 Diversify PCR Random Mutagenesis Kit
관련학술 구매하기 		30 회
 1,580,000원  제조사 페이지로 바로가기 x32608, x32607

  • 타겟 DNA 서열의 mutation rate을 정밀하게 조절
  • Hot spot 없이 광범위한 mutation 유도 가능
  • 모든 종류의 염기서열 치환 가능
  • Random mutation을 조절하여 단백질 기능 연구에도 유용
제품설명
Diversify™ PCR Random Mutagenesis Kit는 독성이 없는 방법을 사용하여 최대 4 kb 길이의 서열에 random mutation을 유발하기 위한 제품이다.

- Diversify 방법
본 제품을 사용하면 mutagenesis 유발 조건을 쉽게 조절할 수 있어서 매우 다양한 사이즈의 DNA 서열에도 최적의 mutation를 도입할 수 있다.
Mn2+와 dGTP의 양을 변화시키는 것으로 mutation rate을 1,000 bp당 2~8개까지 선택하는 것이 가능하다.

Diversify 방법에서는 Clontech의 Titanium Taq PCR 효소 시스템을 이용하여 4 kb까지 DNA 단편을 안정적으로 증폭한다. 이와 같이 다양한 사이즈의 DNA 서열을 증폭할 수 있기 때문에 짧은 DNA 단편은 물론, operon, plasmid 그리고 크기가 큰 단백질을 코딩하는 서열에 mutation을 도입하기에도 이상적이다.

Diversify™ PCR Random Mutagenesis Kit는 TITANIUM® Taq DNA Polymerase (Code 639208)와 함께 사용하도록 최적화되어 있으며, TaqStart™ Antibody (Code 639250)를 포함하는 Titanium Taq PCR 효소 시스템과 mutation을 유발하는 buffer와 시약이 모두 포함되어 있다.


그림 1.  Buffer 조성에 따른 mutation rate 조절. 다른 dNTPs의 농도는 고정한 채 Mn2+와 dGTP의 농도를 변화시킴으로써 mutagenesis 정도를 조절할 수 있다. Buffer 1, 5, 9번에서 mutation rate는 DNA sequencing을 통해 직접 측정하였다 (각 >15,000 bp). 다른 mutations rate은 정량적 in vivo fidelity assay의 mutagenesis level과 DNA 염기서열 분석 결과를 연관시켜 결정하였다.


그림 2. Diversify™ PCR Random Mutagenesis Kit에 의한 4 kb 단편의 증폭. 그림 1의 buffer 조건에서 4 kb plasmid (lane 1-9)를 증폭한 결과를 전기영동을 통해 확인하였다. 큰 사이즈의 염기서열이 잘 증폭된 것을 확인하였으며, 이론적으로 더 긴 단편의 DNA 역시 mutagenesis 및 증폭이 가능하다.
내용 (30 PCR rxns)
구성품명

용량

50X Titanium Taq DNA Polymerase 30 ㎕
10X Titanium Taq PCR Buffer 200 ㎕
50X Diversify dNTP Mix 30 ㎕
50X dNTP Mix (10 mM each) 40 ㎕
dGTP (2 mM) 150 ㎕
Manganese Sulfate (MnSO4 ; 8 mM) 120 ㎕
Control PCR Template (~1ng/㎕) 10 ㎕
Control Primer Mix (10 µM each) 10 ㎕
Taq I Restriction Enzyme (20 units/㎕) 10 ㎕
PCR Grade Water 1.25 ㎖
보존
-20도
관련 제품
- 5＇-exonuclease 활성을 제거한 PCR 효소 : TITANIUM® Taq DNA Polymerase (Code 639208)
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Keyword :
DNA PCR 관련 제품
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Diversify PCR Random Mutagenesis Kit