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Hot spot 없이 Random하게 돌연변이를 도입할 수 있는

Diversify PCR Random Mutagenesis Kit

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	비고	사용자매뉴얼
Clontech	630703	Diversify PCR Random Mutagenesis Kit	30 회	1,264,000원 ~~1,580,000원~~	11.01 ~ 12.27	,

Product index

Overview
High fidelity PCR: PrimeST..
Standard PCR: Ex, LA, rTaq..
Direct PCR: MightyAmp
Dye가 포함된 premix
특수 PCR (Epigenetics, UNG..
PCR Enzyme (Clontech)
DNA PCR 관련 제품
RT-PCR 관련 제품
Mutagenesis
- Diversify PCR Random M..
PCR Subtraction 관련 제품
PCR 장치
- PCR 관련 소모품
- TaKaRa PCR Thermal Cyc..
PCR Accessory Products
- Advantage Ultrapure PC..
- TaqStart Antibody
Whole Genome SNP Detection
- TITANIUM DNA AMPLIFICA..
병원체ㆍ유전자 검출 (PCR)

타겟 DNA 서열의 mutation rate을 정밀하게 조절
Hot spot 없이 광범위한 mutation 유도 가능
모든 종류의 염기서열 치환 가능
Random mutation을 조절하여 단백질 기능 연구에도 유용

제품설명

Diversify™ PCR Random Mutagenesis Kit는 독성이 없는 방법을 사용하여 최대 4 kb 길이의 서열에 random mutation을 유발하기 위한 제품이다.

- Diversify 방법
본 제품을 사용하면 mutagenesis 유발 조건을 쉽게 조절할 수 있어서 매우 다양한 사이즈의 DNA 서열에도 최적의 mutation를 도입할 수 있다.
Mn²⁺와 dGTP의 양을 변화시키는 것으로 mutation rate을 1,000 bp당 2~8개까지 선택하는 것이 가능하다.

Diversify 방법에서는 Clontech의 Titanium Taq PCR 효소 시스템을 이용하여 4 kb까지 DNA 단편을 안정적으로 증폭한다. 이와 같이 다양한 사이즈의 DNA 서열을 증폭할 수 있기 때문에 짧은 DNA 단편은 물론, operon, plasmid 그리고 크기가 큰 단백질을 코딩하는 서열에 mutation을 도입하기에도 이상적이다.

Diversify™ PCR Random Mutagenesis Kit는 TITANIUM^® Taq DNA Polymerase (Code 639208)와 함께 사용하도록 최적화되어 있으며, TaqStart™ Antibody (Code 639250)를 포함하는 Titanium Taq PCR 효소 시스템과 mutation을 유발하는 buffer와 시약이 모두 포함되어 있다.

그림 1. Buffer 조성에 따른 mutation rate 조절. 다른 dNTPs의 농도는 고정한 채 Mn²⁺와 dGTP의 농도를 변화시킴으로써 mutagenesis 정도를 조절할 수 있다. Buffer 1, 5, 9번에서 mutation rate는 DNA sequencing을 통해 직접 측정하였다 (각 >15,000 bp). 다른 mutations rate은 정량적 in vivo fidelity assay의 mutagenesis level과 DNA 염기서열 분석 결과를 연관시켜 결정하였다.

그림 2. Diversify™ PCR Random Mutagenesis Kit에 의한 4 kb 단편의 증폭. 그림 1의 buffer 조건에서 4 kb plasmid (lane 1-9)를 증폭한 결과를 전기영동을 통해 확인하였다. 큰 사이즈의 염기서열이 잘 증폭된 것을 확인하였으며, 이론적으로 더 긴 단편의 DNA 역시 mutagenesis 및 증폭이 가능하다.

내용 (30 PCR rxns)

구성품명	용량
50X Titanium Taq DNA Polymerase	30 ㎕
10X Titanium Taq PCR Buffer	200 ㎕
50X Diversify dNTP Mix	30 ㎕
50X dNTP Mix (10 mM each)	40 ㎕
dGTP (2 mM)	150 ㎕
Manganese Sulfate (MnSO₄; 8 mM)	120 ㎕
Control PCR Template (~1ng/㎕)	10 ㎕
Control Primer Mix (10 µM each)	10 ㎕
Taq I Restriction Enzyme (20 units/㎕)	10 ㎕
PCR Grade Water	1.25 ㎖

보존

-20도