제품 설명
본 시리즈는 PCR용 DNA polymerase, PCR용 반응 buffer, dNTP Mixture를 혼합한 2x premix 제품으로, PCR 반응시 buffer, dNTP Mixture등을 따로따로 첨가할 필요가 없어 조작이 간편하다.
- Premix Taq™ (TaKaRa Taq™ Version), Premix Taq™ (TaKaRa Ex Taq™ 2.0) : 2 x premix solution (각 500 ㎕ x 6 vials)
- One Shot LA PCR Mix Ver. 2.0 : 0.2 ㎖ PCR tube에 25 ㎕씩 분주되어 있는 premix
보존 -20 ℃ (4℃에서 3개월 보존 가능)
조성
Premix Taq™ (TaKaRa Taq™ Version 2.0) (Code R004A) |
TaKaRa Taq |
1.25 U/25 ㎕ |
dNTP Mixture |
2×conc. ; 각 0.4 mM |
PCR buffer |
2×conc. ; 20 mM Tris-HCl (Ph 8.9), 100 mM KCl, 3 mM MgCl2 |
|
Premix Taq™ (Ex Taq™ Version 2.0) (Code RR003A) |
TaKaRa Ex Taq |
1.25 U/25 ㎕ |
dNTP Mixture |
2×conc. ; 각 0.4 mM |
Ex Taq buffer |
2×conc. ; 4 mM Mg2+포함 |
|
|
One Shot LA PCR™ Mix Ver. 2.0 (Code RR004) |
TaKaRa LA Taq |
2.5 U/25 ㎕ |
dNTP Mixture |
2×conc. ; 각 0.8 mM |
LA PCR Buffer II |
2×conc. ; 5 mM Mg2+ 포함2 |
* 2.0 버전은 시약 조성을 개량하여 반응성이 높아졌습니다.
PCR 증폭사이즈
- λ DNA를 주형으로 사용한 경우:
Premix Taq (TaKaRa Taq Version 2.0): 8 kb
Premix Taq (Ex Taq Version 2.0): 20 kb
One Shot LA PCR Mix Ver. 2.0: 28 kb
- Human genomic DNA를 주형으로 사용한 경우:
Premix Taq (TaKaRa TaqVersion 2.0): 약 3 kb
Premix Taq (Ex TaqVersion 2.0): 약 3 kb
One Shot LA PCR Mix Ver. 2.0: 17.5 kb
증폭 산물의 말단
본 제품을 이용해 증폭한 PCR 산물의 대부분은 3＇말단에 A가 1 염기 부가되어 있다. 따라서 PCR 산물을 직접 T-Vector (pMD20 (Code 3270), pMD19 (Simple) (Code 3271) 등) 또는 Mighty TA-cloning Kit (Code 6028)을 이용하여 cloning할 수 있다.
또, Mighty Cloning Reagent Set (Blunt End) (Code 6027)로 평활 말단화 및 인산화를 처리를 하여, 평활 말단 vector에도 cloning할 수 있다.
