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단백질 발현 · 정제
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곤충 세포 단백질 발현 (Baculovirus)
> BacPAK™ p35 ELISA Kit (Single Wash)
간편해진 baculovirus 역가 측정 키트
BacPAK™ p35 ELISA Kit (Single Wash)
제조사
제품코드
제품명
용량
가격
(부가세별도)
비고
사용자매뉴얼
Clontech
631477
BacPAK™ p35 ELISA Kit (Single Wash)
96 회
1,405,000원
,
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Baculovirus의 titer를 ELISA로 간편하게 측정
감염으로부터 20시간 이내에 역가 확인 가능, 약 2시간의 hands on time
1×10
5
~ 10
7
pfu/㎖ (IFU/㎖) 광범위한 역가 측정 가능 (검출한계: 10
4
pfu/㎖)
제품 설명
BacPAK p35 ELISA Kit (Single Wash)는 baculovirus에서 발현하는 p35의 농도 (ng/㎖)를 ELISA법으로 정량하는 제품으로, 이미 역가를 알고 있는 reference virus stock의 p35 값과 비교/환산
*
을 통해 알고자 하는 baculovirus 샘플의 functional titer를 결정할 수 있다.
p35는 바이러스의 세포 감염에 필수적인 초기 발현 단백질로 감염 시 세포의 apoptosis를 저해한다. 감염 4~12시간 후 세포질 기질에서 검출되므로, 세포의 형태 변화나 바이러스 출아가 일어나기 전에 바이러스 단백질의 발현정도를 정확하게 측정할 수 있다. 본 제품은 약 2시간의 hands on time으로 20시간 이내에 baculovirus 역가를 측정하며, 10
4
pfu/㎖ (IFU/㎖) 이상의 바이러스의 측정이 가능하다.
*
샘플의 역가를 측정하기 전에, 미리 역가를 알고 있는 reference virus를 테스트하여 p35 값을 얻으면, 역가 확인이 필요했던 샘플의 pfu/㎖ (IFU/㎖) 단위 역가로도 계산(환산)할 수 있다.
- 쉽게 환산하는 온라인 tool 바로가기:
Baculovirus p35-to-IFU calculator (TB USA 페이지로 이동합니다.)
그림 1. BacPAK™ p35 ELISA Kit (Single Wash) workflow
A. 바이러스 샘플 serial dilution
B. 희석한 바이러스를 곤충 세포에 감염시킨 후 27℃, 16~20시간 incubation
C. 첨부된 Lysis Buffer로 감염 세포를 용해하고 ELISA로 샘플의 역가 (p35값)를 측정 (ng/㎖)
그림 2. BacPAK™ p35 ELISA Kit (Single Wash) 원리
ELISA plate에 cell lysate와 HRP-anti-p35 detection antibody를 추가하면, 샘플 내의 p35는 플레이트에 고정화되어 있는 capture antiboody와 결합하고, HRP-anti-p35 detection antibody와 결합하여 표지된다. Washing Buffer로 세척 후, TMB Substrate로 발색시킨다. Stop Solution으로 반응을 정지시킨 후, 흡광도 (450 nm)를 측정하여 p35 농도 (ng/㎖)를 정량한다.
내용
Anti-p35 Coated Plate (96 well:8 well×12 strips)
p35 Control
Lysis Buffer
p35 Buffer
Anti-p35 (HRP Conjugate)
Washing Buffer (20×)
TMB Substrate
Stop Solution
보존 4℃
Washing Buffer (20×)를 냉장 보관하면 침전이 발생할 가능성이 있다.
- 침전이 나타난 경우 37℃에서 용해하여 사용
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