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Phosphoprotein enrichment kit
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빠르고, 특이적인 affinity 기반의 phosphoproteins의 농축
Nondenaturing method로 단백질 구조와 용해성을 유지
최종 용출액에는 세포 종류에 따라서 14-17% phosphoprotein 함유
비방사성 세포 신호 연구 및 2D-PAGE에 적합
Phosphoprotein Enrichment Kit는 mammalian 세포와 조직으로부터 인산화된 단백질을 분리하기 위한 효과적인 affinity 기반의 방법을 제공한다 (Figure1; 1-2). 각 제품은 serine, tyrosine, threonine을 포함한 변형된 아미노산에 상관없이 cytosol이나 막에 결합된 phosphoprotein을 농축하기 위한 6 개의 높은 수용력을 갖는 gravity column과 함께 사용하는 완벽한 buffer 세트를 가지고 있다.
고도로 선택적인 Phosphoprotein의 농축
Phosphoprotein Enrichment Kit는 어떤 mammalian 세포와도 함께 사용할 수 있다. 검토된 세포 종류에는 NIH 3T3, HEK 293, HeLa, Cos-7, Jurkat이 있다. 농축 작업은 Western blotting 분석법으로 확인한 결과 아주 효율적이었으며, (Figure 1) colorimetric phosphate detection법을 사용하여 대다수의 phosphoprotein이 분리되었음을 확인하였고, wash fraction에서는 아주 극소량의 단백질을 확인하였다.
Figure 1. Highly effective phosphoprotein enrichment.
A Phosphoprotein Affinity Column was loaded with ~3 mg of total protein from HEK 293 cells. The extract (Lanes 1), flowthrough (Lanes 2), wash (Lanes 3), and eluate (Lanes 4) were then analyzed by Western blotting using antibodies specific for phosphorylated AKT (
Panel A)
, PTEN (
Panel B
) & GSK3β (
Panel C
) proteins.
Components & Storage Conditions
각 제품 구성물과 보관조건은 Certificate of Analysis 를 참조하십시오.
References
1. BD Phosphoprotein Enrichment Kit (April 2003) Clontechniques XVIII(2):4-5. 2. BD Phosphoprotein Enrichment Kit (July 2004) Clontechniques XIX(3):12-13.
Keyword :
당/인산화 단백질 관련
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