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His-tagged protein 고순도 정제

TALON (Cobalt) resin & column

-

제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Clontech
635501
TALON Metal Affinity Resin
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10 ml
225,000원  제조사 페이지로 바로가기 x33126, x33127
Clontech
635502
TALON Metal Affinity Resin
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25 ml
485,000원  제조사 페이지로 바로가기
Clontech
635503
TALON Metal Affinity Resin
관련학술 구매하기
100 ml
1,828,000원  제조사 페이지로 바로가기
Clontech
635504
TALON Metal Affinity Resin
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250 ml
2,880,000원  제조사 페이지로 바로가기
Clontech
635652
TALON Metal Affinity Resin
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250 ml x 2
5,472,000원  제조사 페이지로 바로가기
Clontech
635653
TALON Metal Affinity Resin
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250 ml×4
10,368,000원  제조사 페이지로 바로가기
Clontech
635606
TALON 2 ml Disposable Gravity Column
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50 개
239,000원  제조사 페이지로 바로가기 x33126, x33127
Clontech
635655
HisTALON Gravity Columns
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1 ml×5
262,000원  제조사 페이지로 바로가기 x32712, x32713
Clontech
635654
HisTALON Gravity Columns Purification Kit
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1 Kit
707,000원  제조사 페이지로 바로가기 x32712, x32713, x32714
Clontech
635651
HisTALON Buffer Set
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20 회
445,000원  제조사 페이지로 바로가기 x32713, x32714, x33126, x33127

  • Cobalt 이온을 이용한 IMAC resin : Nickel resin 보다 고순도로 his-tagged protein 정제
  • 다양한 정제 조건에서 사용 가능
제품 설명
TALON® resin은 cobalt를 이용해 his-tagged protein을 정제하는 immobilized metal affinity chromatography (IMAC) resin이다. Cobalt는 nickel보다 his-tagged protein에 대해 높은 특이성을 나타내므로 his-tagged protein을 고순도로 정제할 수 있다. 또한 각 cobalt 이온이 resin의 4개 부위에 결합되어 있어 금속이온 누출이 적은 장점도 있다.
TALON® resin의 특징
TALON resin
TALON® resin은 cobalt를 이용해 his-tagged protein을 정제하는 immobilized metal affinity chromatography (IMAC) resin이다. Cobalt는 nickel보다 his-tagged protein에 대해 높은 특이성을 나타내므로 his-tagged protein을 고순도로 정제할 수 있다.
Cobalt를 포함한 결합 부위
TALON® Metal Affinity Resin은 결합 부위에 cobalt 이온을 포함하고 있어, his-tagged protein에 대해 매우 높은 특이성을 가지고 있다. Cobalt 이온을 포함한 TALON® 결합부위는 histidine의 위치에 매우 까다로워 histidine이 공간적으로 연속해 있거나, 가까이 위치한 (6x HN tag, HAT tag 등) 단백질만 resin에 결합할 수 있다. 반면 nickel 기반의 resin (Ni-NTA resin 등)은 이러한 특이적인 서열이 아닌 histidine이 불규칙하게 배치된 서열에도 결합하므로, 상대적으로 cobalt 기반의 TALON® resin이 nickel에 비해 his-tagged protein을 특이성 높게 정제할 수 있다.
금속이온 탈락이 적은 균일한 matrix 구조
Cobalt resin은 nickel resin에 비해 더 균일한 구조를 가진다. TALON® resin은 3차 포켓구조를 형성하며 각각 3개의 carboxyl 그룹과 하나의 질소원자가 cobalt 양이온과 결합한 구조로, 이러한 구조는 cobalt 이온이 2개의 인접한 histidine 잔기와 결합되도록 한다. 따라서 cobalt 이온이 매우 단단하게 결합되어 있어 resin에서 누출되지 않는다. 반면 nickel resin은 nickel 이온이 TALON® ligand와 유사한 3차 포켓구조나 평면구조, 즉 2개의 다른 배위구조를 형성할 수 있어 TALON®에 비해 구조가 덜 균일하다. 평면 구조에서 nickel 이온은 2개의 carboxyl 그룹과 하나의 질소원자에 결합하고 있어 TALON®에 비해 결합이 약하고 nickel 이온을 강하게 유지할 수 없어 resin에서의 누출이 일어난다. 균일한 matrix를 형성하는 TALON® Metal Affinity Resin은 여러 정제 조건 하에서 높은 결합능력을 가지므로 확실하게 his-tagged protein을 정제할 수 있다.

그림. 변성 조건에서의 6xHis-GFPuv 정제 예
8M urea 존재 하에 TALON® resin을 이용해 his-tageed protein을 정제하였다. M=molecular weight markers.


그림. Beta-mercaptoethanol (β-ME) 존재 하에서의 6xHis-DHFR 정제 예
(A) 6x His tagged mouse DHFR을 발현하고 있는 E. coli cell lysate 2 ㎖을 TALON® Resin을 이용하여 여러 가지 농도의 β-ME 존재하에서 gravity flow로 정제한 결과, 30 mM β-ME 존재 하에서도 6xHis-DHFR이 정제됨을 확인하였다 (짝수 lane: flowthrough 20 ㎕, 홀수 lane: elute 5 ㎕).
(B) Beta-mercaptoethanol (β-ME) 존재하에서 TALON®과 Ni-NTA의 6xHis-DHFR 정제수율을 비교한 결과, TALON® resin을 이용했을 때 Ni-NTA보다 고농도의 β-ME 존재 하에도 단백질을 높은 효율로 정제할 수 있었다.


그림. TALON® Metal Affinity Resin & TALON 2 ㎖ Disposable Gravity Column
보존
TALON® Metal Affinity Resin:4℃
Components & Storage Conditions
각 제품 구성물과 보관조건은 Certificate of Analysis 를 참조하십시오.
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Keyword :

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