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Transfection 시약을 포함하여 더 간단한 packaging vector mix

Packaging single shots

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)
Clontech	631275	Lenti-X™ Packaging Single Shots (VSV-G)	16 회	1,460,000원
Clontech	631276	Lenti-X™ Packaging Single Shots (VSV-G)	96 회	4,278,000원
Clontech	631282	Lenti-X™ Packaging Single Shots (96-well, VSV-G)	4 x 96-well plates	2,040,000원
Clontech	631277	Lenti-X™ Packaging Single Shots (Integrase Deficient)	16 회	1,878,000원
Clontech	631278	Lenti-X™ Packaging Single Shots (Ecotropic)	16 회	1,878,000원
Clontech	631294	Lenti-X™ Packaging Single Shots (Envelope-Free)	16 회 (Package)	2,146,000원

Product index

4세대의 lentiviral packaging system으로, 편리함과 성능을 극대화한 형태
재현성 있게 높은 역가 (10⁷-10⁸ IFU/㎖)로 virus packaging
간단한 프로토콜: Lentiviral DNA를 넣고 섞은 후 전용 packaging cell line에 첨가하면 반응 완료 (단, Envelope-free 타입의 경우, envelope의 cloning 과정이 요구됨)
각 tube 혹은 well 내 transfection 시약과 lentiviral packaging vector, buffer가 최적의 비율로 분주 및 동결건조 되어 있어, 추가적인 transfection 시약 조건 검토 불필요
적용하고자 하는 세포, application에 따라 envelop type 선택

제품 설명

Lenti-X™ Packaging Single Shots은 4세대 lentivirus packaging system으로, 아주 편리한 one-step 방식으로 실험을 진행하며, 전용 packaging cell을 이용했을 때 일반적으로 10⁷-10⁸ IFU/ml의 고역가 Lentivirus를 생산할 수 있다.

제품은 lentivirus를 packaging 할 수 있는 vector와 transfection 시약이 모두 최적의 비율로 single tube 내에 분주 및 동결건조 되어 있는 형태로, 발현을 원하는 tropism (envelope)을 선택할 수 있다. 또한, single tube 형태와 96 well plate 형태를 선택할 수 있어, high-throughput이 요구되는 실험에도 적용할 수 있다.

Tropism (envelope)	제품명	Application
VSV-G	Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G) Lenti-X Packaging Single Shots (96-well, VSV-G)	거의 모든 세포에 감염력을 가져 일반적으로 사용됨
Ecotropic	Lenti-X Packaging Single Shots (Ecotropic)	MLV ecotropic envelope glycoprotein을 가진 mouse cell 혹은 rat cell에 유용
Integrase deficient	Lenti-X Packaging Single Shots (Integrase Deficient)	Host cell genome으로 DNA integration되는 효율을 감소시켜 일시적 발현 유도
Envelop-free	Lenti-X Packaging Single Shots (Envelope-Free)	원하는 envelope를 직접 cloning하여 사용

VSV-G, ecotropic 외의 tropism을 적용했을 때 더 높은 유전자 도입 효율이 기대되는 경우
Narrowed tropism에서 높은 감염 효율을 보이는 특정한 cell type 적용 시
Envelope 예) Baboon envelope, Cocal envelope, Measles envelope, Mokola envelope, Ebola envelope 등
Target cell 예) 조혈모세포 (hematopoietic cell), 면역세포 (immune cell - T cell, B cell 등), 특정 장기 타겟

Lenti-X Packaging Single Shots (Envelope-Free)는 single shot 내 envelope vector가 포함되어 있지 않고, 별도의 empty vector 형태로 제공된다. 따라서 원하는 envelope protein 서열을 직접 cloning하고, lentiviral expression vector와 함께 single shot에 넣어 virus를 packaging한다. 또한 transduction 효율을 확인할 수 있도록 ZsGreen1와 luciferase를 각각 발현하는 reporter vector 2종이 제품 내 포함되어 있다.

그림 1. The Lenti-X™ Packaging Single Shots (VSV-G) protocol.

실험 주의사항

- 4세대의 lentivirus packaging system은 Tet-off 기술이 도입되어 있어, packaging cell 배양 시 tetracycline을 포함하지 않는 배지 조건으로 배양해야 한다. Tetracycline-derived contaminants로 인한 background를 최소화할 수 있는 Tet approved FBS의 사용을 적극 권장한다.
- 제품 내에는 packaging cell line을 포함하고 있지 않다. 보다 고역가의 바이러스를 생산할 수 있는 Lenti-X™ 293T Cell Line (Code 632180)를 함께 구매하여 사용할 것을 추천한다.

Applications

- 다양한 envelope을 가진 Lentivirus 생산
- Transfection 효율이 낮은 세포 내 유전자 도입
- Stable cell line 구축
- Lentivirus를 이용한 CRISPR 혹은 shRNA screening, vector optimization의 HTP 분석

구성품 (자세한 내용은 CoA를 참조하세요)

* Lenti-X™ Packaging Single Shots (VSV-G) (Code 631275)
   1 box containing 16 Lenti-X™ Packaging Single Shots (VSV-G), in a foil pouch

* Lenti-X™ Packaging Single Shots (VSV-G) (Code 631276)
   1 box containing 96 Lenti-X™ Packaging Single Shots (VSV-G), in a foil pouch

* Lenti-X™ Packaging Single Shots (96-well, VSV-G) (Code 631282)
   4 x Lenti-X Packaging Single Shots 96-well Plate (VSV-G) in foil pouches

* Lenti-X™ Packaging Single Shots (Ecotropic) (Code 631277)
   1 box containing 16 Lenti-X Packaging Single Shots (Ecotropic), in a foil pouch

* Lenti-X™ Packaging Single Shots (Integrase deficient) (Code 631278)
   1 box containing 16 Lenti-X™ Packaging Single Shots (Integrase Deficient), in a foil pouch

* Lenti-X Packaging Single Shots (Envelope-Free) (Code 631294)
   Lenti-X Packaging Single Shots (Envelope-Free)
   pEmpty Vector
   Lenti-X Reporter Vector Set

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