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RT-PCR 필수품

Recombinant RNase Inhibitor

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	비고	사용자매뉴얼
Takara	2313A	Recombinant RNase Inhibitor	5,000 U	137,000원
Takara	2313B	Recombinant RNase Inhibitor	25,000 U (2313A x 5)	616,500원

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제품설명

Recombinant RNase Inhibitor는 돼지 간 유래의 RNase inhibitor를 대장균 숙주에서 발현, affinity column 등을 이용하여 정제한 재조합 단백질이다. 이는 인간 태반이나 돼지 간에서 직접 정제한 RNase inhibitor와 매우 유사한 성질을 가지며, RNase A와 1:1 복합체를 형성하여 RNase의 작용을 억제한다.
이러한 반응은 가역적이므로, urea 또는 sulfhydryl 시약으로 복합체를 해리 시킴으로써 RNase의 활성을 되살리고, inhibitor를 비가역적으로 실활 시킬 수 있다. 또한, 기존의 길항성 저해제 (nucleotide류, 무기인산류)와는 달리 단백질이므로 페놀 처리로 반응계에서 간단히 제거할 수 있다. 반면 RNase H의 활성은 저해하지 않는다.
이 제품은 인간 태반에서 유래한 RNase와 동일한 용도로 사용 가능하며 human DNA 오염이 우려되는 경우 유용하게 사용할 수 있다

보존 -20℃

농도 40 U/㎕

형상

20 mM		HEPES-KOH (pH 7.5)
50 mM		KCl
5 mM		DTT
50 %		Glycerol

활성의 정의

5 ng의 RNase A 활성을 50% 저해하는 효소 활성을 1 U으로 한다.
(저해 활성은 RNase A에 의한 Cyclic 2’, 3’-CMP의 가수분해를 억제하는 능력에 의해 정량 되었다.)

용도

- cDNA 합성 시 (RNase inhibitor, 0.5 U/㎕ reaction)
- in vitro translation (RNase inhibitor, 1 U/㎕ reaction)
- in vitro transcription with cell-free extract (RNase inhibitor, 20 U/㎕ reaction)
- in vitro transcription with SP6 or T7 polymerase (RNase inhibitor, 1 U/㎕ reaction)
- Polysome isolation (RNase Inhibitor, 1,000 U/㎖ reaction)

기원

- 돼지 간 유래의 RNase inhibitor 유전자를 가진 plasmid를 발현하는 E. coli

일반적인 성질

- 분자량: 약 52,000
- 등전점: pH5.0
- 최적 pH: pH6~9
- 최적 온도: 25℃ ~ 50℃
- 활성화제:
환원제 DTT (free 상태의 -SH기를 보호하기 위해서 storage buffer에 최소 1mM의 DTT가 필요하다.)
- 안정성:
기포 혹은 강한 충격에 효소가 비활성화 될 수 있다.
65℃ 15분의 열처리로 비활성화 할 수 있다.

사용상의 주의

- 넓은 pH 범위에서 억제 활성을 보이며 pH7~8에서 최고활성을 보인다.
- 활성을 발현하기 위해서는 최소 1mM의 DTT가 필요하다.
- 이 제품에는 buffer가 포함되어 있지 않다.

용도

- 탁월한 신장능력 및 정확도를 가진 역전사 효소, PrimeScript™ Reverse Transcriptase (Code 2680A)
- cDNA 합성을 위한 all-in-one 최신제품, PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix (Code 6215A)
- 고품질 고수율 in vitro transcription을 위한 시스템, Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System (Code 6141)
- gDNA Eraser Column으로 gDNA 오염 없이 다양한 샘플의 RNA 정제, TaKaRa MiniBEST Universal RNA Extraction Kit (Code 9767A)

Keyword :

Reverse Transcription (Takara)

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