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Home > 전제품보기 > Gene transfer (virus) > Lentivirus > Lenti-X™ p24 Rapid Titer Kit (Single Wash)
p24 ELISA로 빠르고 정확하게 역가 측정

Lenti-X™ p24 Rapid Titer Kit (Single Wash)

-

제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Clontech
631476
Lenti-X™ p24 Rapid Titer Kit (Single Wash)
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Clontech
632200
Lenti-X™ p24 Rapid Titer Kit
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x32776, x32777


  • ELISA법으로 간단하게 lentivirus 양 측정 (titration)
  • 분리가 가능한 12 X 8-well strip 형태의 96-well로 실험에 따라 flexible하게 적용 가능
  • 보다 신속하게 결과를 얻을 수 있는 Single Wash 타입 (~1.5 h) 출시


Virus titration이 필요한 이유
    1. Lentivirus Packaging 과정이 제대로 되었는지 확인
    2. 오차없이 일관된 실험수행
    3. 100% Transduction을 위한 충분한 MOI 결정
    4. Copy number 조절을 통한 유전자 발현양 조절

제품설명
Lentivirus는 현재 다양한 목적으로 Cell & Gene therapy 분야에서 사용되고 있다. 이 바이러스는 gag 유전자에 의해 발현되는 capsid 단백질 (p24), nucleocapsid 단백질 (p6 및 p7), matrix 단백질 (p17) 등을 가지고 있다. 이 중 capsid 단백질인 p24 (그림 1)의 농도는 lentivirus의 실제 역가와 높은 상관관계에 있다. Lenti-X™ p24 Rapid Titer Kit는 배양 상등액의 lentivirus가 가진 p24 단백질의 양을 측정하는 ELISA Kit이다.

그림 1. Lentivirus 구조
p24 단백질은 HIV-1 유래의 gag 유전자에서 발현되는 4개의 단백질 중 하나로 lentivirus의 capsid에 존재한다.
Lenti-X™ p24 Rapid Titer Kit (Single Wash), Lenti-X™ p24 Rapid Titer Kit 비교

Lenti-X™ p24 Rapid Titer Kit (Single Wash)

Lenti-X™ p24 Rapid Titer Kit

Code

631476

632200

2 항체

HRP 라벨링

Biotin 라벨링

실험 시간

1.5 시간

3 시간

전체 실험 과정

4 단계

8 단계

Wash 횟수

1 번

3 번

p24 측정 범위

100~1,600 pg/㎖

12.5~200 pg/㎖



그림 2. Lenti-X™ p24 Rapid Titer Kit (Single Wash)의 workflow

배양 상등액, Lysis Buffer 및 Anti-p24 (HRP Conjugate)를 포함한 샘플을 Anti-p24 Coated Plate의 well에 첨가하여 incubation한다. 이후 wash하고 발색 시약을 첨가하면 p24 단백질을 정량할 수 있다.
바이러스의 감염성과 p24 titration의 상관관계
ELISA를 사용한 titration kit는 사용이 편리하고 재현성이 높으며 짧은 시간 안에 정확한 결과를 제공하기 때문에 바이러스의 titration에 이상적이다. 또한 바이러스 stock의 functional titer (IFU/㎖)을 별도의 독립적인 방법으로 같이 측정하면 p24 titer (ng/㎖)와 functional titer의 계수 (IFU/ng)를 구할 수 있다. 이 계수를 활용하면 추후 실험에서 짧은 시간내에 얻은 p24 titer를 활용해 functional titer (IFU/㎖)를 추정할 수 있고 이를 바탕으로 MOI를 계산할 수 있다.
내용
Lenti-X™ p24 Rapid Titer Kit (Single Wash) (Code 631476)
   Anti-p24 Coated Plate (96 well)

1 개

   p24 Control

500 ng

   p24 Reconstitution Buffer

1.5 ㎖

   Diluent Buffer

20 ㎖

   Anti-p24 (HRP Conjugate)

12 ㎖

   Lysis Buffer

4 ㎖

   Washing Buffer (20X)

50 ㎖

   TMB Substrate

12 ㎖

   Stop Solution

12 ㎖


Lenti-X™ p24 Rapid Titer Kit (Code 632200)
   Anti-p24 Coated Plate (96 wells)

1 개

   p24 Control (10 ng/㎖)

100 ㎕

   Lysis Buffer

6 ㎖

   Anti-p24 (Biotin Conjugate)

12 ㎖

   Streptavidin HRP

12 ㎖

   Wash Buffer (20X)

120 ㎖

   TMB Substrate

12 ㎖

   Stop Solution

12 ㎖

보존
Lenti-X™ p24 Rapid Titer Kit (Single Wash)
  • 4℃ 보관
  • 20X Wash Buffer는 첫 사용 후 실온 보관

Lenti-X™ p24 Rapid Titer Kit
  • 4℃ 보관
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