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고속 PCR 용 Dye plus PCR Premix

Fast PCR용 premix

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	비고	사용자매뉴얼
Takara	RR350A	SapphireAmp® Fast PCR Master Mix	160 회 (50 μl 반응계)	148,800원 ~~186,000원~~	09.01 ~ 10.30
Takara	RR350B	SapphireAmp® Fast PCR Master Mix	800 회 (RR350A x 5)	837,000원

Product index

Overview
High fidelity PCR: PrimeST..
Standard PCR: Ex, LA, rTaq..
Direct PCR: MightyAmp
Dye가 포함된 premix
특수 PCR (Epigenetics, UNG..
PCR Enzyme (Clontech)
DNA PCR 관련 제품
RT-PCR 관련 제품
Mutagenesis
- Diversify PCR Random M..
PCR Subtraction 관련 제품
PCR Accessory Products
- Advantage Ultrapure PC..
- TaqStart Antibody
Whole Genome SNP Detection
- TITANIUM DNA AMPLIFICA..
병원체ㆍ유전자 검출 (PCR)

신장 시간 "10초/kb" 고속 PCR을 실현하는 Hot start PCR용 dye plus premix
간단하게 Primer와 template DNA, DW를 추가하여 PCR반응 후, 증폭산물을 그대로 전기영동 가능
단시간에 결과를 확인할 수 있어 Colony PCR등에 최적

제품설명

SapphireAmp^® Fast PCR Master Mix (2×Premix)은 신장 시간 10초/kb의 고속반응이 가능한 dye plus premix이다.
고속 PCR에 필요한 component (최적화된 buffer, PCR효소, dNTP Mixture 등)와 전기영동시에 편리한 색소 마커 (파랑) 및 비중제를 포함하는 2 x Hot Start PCR premix 이다.
Primer와 template DNA를 첨가하는 것으로 간단히 고속 PCR을 수행할 수 있고, 반응 후에는 반응액을 직접 전기영동할 수 있에 작업 효율을 향상할 수 있다.
본 제품을 이용하면 단시간에 대장균의 colony PCR에 의한 insert 확인 (~5 kb전후 증폭에 추천)을 진행할 수 있다 (5 kb 증폭 소요시간; 약 1시간 15분). 또한 human genomic DNA를 주형으로 한 PCR에서 6 kb의 증폭을 확인하고 있다.

내용(160회, 50 ㎕ PCR 반응시)

1.	SapphireAmp Fast PCR Master Mix (2×Premix)	1 ㎖×4
2.	dH₂O	1 ㎖×4

보존 -20℃

증폭 산물의 말단

SapphireAmp^® Fast PCR Master Mix를 이용해 증폭한 PCR 산물의 대부분은 3＇말단에 A가 1 염기 부가되어 있다. 따라서 PCR 산물을 직접 T-Vector (pMD20 (Code 3270), pMD19 (Simple) (Code 3271) 등) 또는 Mighty TA-cloning Kit (Code 6028)을 이용하여 cloning할 수 있다.
또, Mighty Cloning Reagent Set (Blunt End) (Code 6027)로 평활 말단화 및 인산화를 처리를 하여, 평활 말단 vector에도 cloning할 수 있다.

실험 예 - 다양한 insert 확인을 위한 colony PCR

E. coli에 형질전환한 마우스 cDNA유래의 pUC118 library (0.5 kb ~ 5 kb의 insert 삽입)를 colony PCR하여, 다양한 크기의 증폭산물 (0.5 kb ~ 5 kb)를 확인할 수 있었다.

샘플: E. coli colony를 tip으로 긁어 PCR 반응액에 현탁한 후 PCR 증폭
PCR 조건
  94 ℃ 1 min.
  ↓
  98 ℃ 5 sec.
  55 ℃ 5 sec.      30 cycles
  72 ℃ 40 sec.
PCR 소요 시간: 1시간 11분 (TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice^® 사용)